Ecological Engineering and Environment Protection

Джамал Дауд, Димитър Караманев
Резюме.През изминалите няколко години са публикувани редица статии по използването на смесена микробна култура съдържаща предимно Leptospirillum и Ferroplasma за полупромишленото производство на електроенергия в микробни горивни клетки. Кинетиката на биоокисление на феройони от Ferroplasma acidiphilum зависи от редица фактори. В този труд е изучено влияниято на рН, температурата, концентрацията на железни йони и на органични добавки върху кинетиката на процеса с оглед да се намали образуването на ярозит. Микробна култура на Leptospirillum беше добавена към F. acidiphilum за да се определи влиянието на органичните съставки върху активността ѝ. Микроорганизмите бяха определени с използването на флуоресцентна хибридизация (FISH). Резултатите показаха, че биоокислението на феройони протича най-бързо при концентрация на дрожден екстракт 0,02%, рН 1,6, температура 35°С и начална концентрация на феройони 1 г/л, при което максималната специфична скорост на растеж е между 0,035 и 0,042 час^-1. Отношението между F. acidiphilum и Leptospirillum е симбиотично, като F. acidiphilum намалява концентрацията на органични вещества до окло 20 мг/л общ органичен въглерод, и не позволява последните да влияят негативно върху Leptospirillum.

Ключови думи: Ferroplasma acidiphilum, биоелектрохимични системи, миксотроф, двувалентно желязо, биокинетика, общ органичен въглерод

BIOKINETIC CHARACTERIZATION OF FERROPLASMA ACIDIPHILUM

Jamal Daoud, Dimitre Karamanev
Western University, London, Ontario, Canada, N6G 5B9

Abstract. Recently a mixed culture dominated by the iron-oxidizing microorganisms Leptospirillum and Ferroplasma has been used in a large-scale microbial fuel cell for electrical power generation. There are many factors that affect the kinetics of iron oxidation by the mixotroph Ferroplasma acidiphilum. This study investigated the effects of pH, temperature, and substrate and yeast extract concentrations in order to arrive at kinetically favorable operating conditions with minimal jarosite precipitation. Furthermore, F. acidiphilum was cultured with Leptospirillum sp. in order to determine its viability as a species capable of limiting the organic by-products of chemolithotrophic microbial growth. Bacterial characterization in the culture was accomplished using fluorescent in situ hybridization (FISH). It was found that the ferrous iron oxidation was most favorable at yeast extract concentration of 0.02% (w/v), pH of 1.6, temperature of 35 ^oC and an initial ferrous iron concentration of 1 g/L yielding a maximum specific growth rate of 0.0351-0.042 h^-1. Moreover, F. acidiphilum displayed a symbiotic relationship with its chemolithotrophic counterpart, Leptospirillum sp. in that they were able to utilize the metabolic organic products of the chemolithotroph and limit the organic concentration to ~20 ppm total organic carbon (TOC), well below the threshold concentration of 250 ppm for chemolithotroph activity.

Keywords: Ferroplasma acidiphilum; Bioelectrochemical system; Mixotroph; Ferrous iron oxidation; Biokinetics; Total organic carbon.

МИНЕРАЛНИТЕ ВОДИ В БЪЛГАРИЯ
Александър Садовски
Резюме: Настоящото изследване има за цел да направи преглед на източниците на минерална вода в България, както и различните аспекти на използването им като енергиен източник, в полза на човешкото здраве и националната икономика. Цитират се основни литературни източници по темата. Извършен е статистически анализ и са обобщени данни за техните физични и химични характеристики и особено за разпределението по температура. Производството на евтина топлинна енергия от геотермалните централи допринася за намаляване на замърсяването на околната среда, което е от голямо значение за страната. Изключително добрите биоклиматични ресурси в страната дават основа за перспективно развитие на балнеологичния отрасъл. Показани са бариерите пред геотермалното развитие в страната. Заключава се, че се подценява значението на геотермалната енергия от минерални води в България.

Ключови думи: минерални води, енергия, температура, здраве на човека.

MINERAL WATERS IN BULGARIA

Alexander Sadovski

IEAS/EUROPE, Finland
Abstract: The present study aims to review the sources of mineral water in Bulgaria, as well as the various aspects of their use as an energy source, benefit for human health and the national economy. Several literary sources on the subject are cited. Statistical analysis was performed and data were summarized about their physical and chemical characteristics, and especially to find distribution by temperature. The production of cheap thermal energy from the geothermal plants contribute to the reduction of the environment pollution, which is of great importance for the country. The extremely good bio-climatic resources in the country provide a base for the prospective development of the balneological branch. The barriers to geothermal development in the country are shown. It is concluded that the importance of geothermal energy from mineral waters in Bulgaria is underestimated.

Keywords: mineral waters, energy, temperature, human health.

МИКРОБНО ОТСТРАНЯВАНЕ НА ДВУВАЛЕНТНИ ТОКСИЧНИ МЕТАЛИ
Ирина Бида, Олеся Хаврилюк, Вира Ховоруха, Галина Гладка, Александър Таширев
Резюме. Проблемите с пречистването на полиметални отпадъчни води от минни предприятия, както и с натрупването на органични отпадъци са важни в световен мащаб. Прилагането на всички съществуващи методи за пречистване на отпадъчни води е неефективно и невъзможно поради огромните обеми и високи концентрации на метали. По същия начин съвременните методи са неефективни за третиране на огромни количества органични отпадъци. Ето защо е необходимо да се разработят нови екологични биотехнологии, осигуряващи едновременно разграждане на органични отпадъци и детоксикация на токсични метали. Целта на работата беше теоретично да се обоснове и експериментално потвърди възможността за отстраняване на токсични двувалентни катиони чрез дисимилираща сулфатна редукция чрез анаеробна биодеградация на екологично опасни моделни органични отпадъци. Използвани са колориметрични и потенциометрични методи за измерване на pH и редокс потенциал; обемни и хроматографски методи – за отчитане на обема и състава на синтезирания газ; перманганатен метод – за определяне концентрацията на разтворен органичен въглерод (РОВ); за определяне на концентрацията на амониеви йони е използван фотоколориметричен метод чрез качествена реакция с реактив на Неслер. Съдържанието на Co²⁺ и Ni²⁺ в средата се определя по колориметричен метод с 4-(2-пиридилазорезорцинол. Параметрите на биодеградацията са изчислени с помощта на математически и статистически такива. Модифицирана Postgate B среда с различни източници на въглерод и енергия (картофи, аланин и месо) се използва за култивиране на дисимилиращи сулфат редуциращи бактерии. Анаеробният микробиом, получен от утайката от метантанкове, показа висока ефективност за отстраняване на Co²⁺ и Ni²⁺ от течната среда. Най-високата ефективност (100% за 9 дни) се наблюдава, когато аланинът се използва като източник на въглерод и енергия. Най-бавният процес на утаяване на метал е настъпил при използване на месо (20 дни). Също така, използването на протеинов субстрат не осигурява очакваното алкализиране на средата, което може значително да ускори процеса на утаяване на метал. Утаяването на кобалтови и никелови катиони по време на водородната ферментация на картофено нишесте се усложнява от подкисляването на средата, но е също така ефективно, когато pH се регулира. Предложеният подход, бавната дисимилираща сулфатна редукция, дължаща се на умерено разтворимия калциев сулфат като акцептор на електрони, може да се използва като основа за разработването на нови биотехнологии за третиране на отпадъчни води, замърсени с двувалентни тежки метали, с едновременното третиране на екологично опасни съединения.
Ключови думи: термодинамично прогнозиране, пречистване на отпадъчни води, съдържащи метали, екологични биотехнологии, детоксикация на метали, замърсяване с метали, токсични метали, сулфатна редукция, амонификация, опасни за околната среда съединения

MICROBIAL BIOREMOVAL OF DIVALENT TOXIC METALS

Iryna Bida, Olesia Havryliuk, Vira Hovorukha, Galyna Gladka, Oleksandr Tashyrev

Zabolotny Institute of Microbiology and Virology of the NAS of Ukraine, Kyiv, Ukraine

Abstract. The problems of polymetallic wastewater treatment from mining enterprises as well as the accumulation of organic waste are acute worldwide. The application of any existing methods of wastewater purification is ineffective and impossible due to the huge volumes and high concentrations of metals. Similarly, modern methods are ineffective for the treatment of huge amounts of organic waste. Therefore, there is a necessity to develop novel environmental biotechnologies providing the simultaneous degradation of organic waste and detoxification of toxic metals. The purpose of the work was to theoretically substantiate and experimentally confirm the possibility of toxic divalent cations removal using dissimilatory sulfate reduction via anaerobic fermentation of ecologically hazardous model organic waste. Colorimetric and potentiometric methods were used for pH and redox potential measurement; volumetric and chromatographic methods – to control volume and composition of synthesized gas; permanganate method – to determine the concentration of dissolved organic carbon (DOC); photocolorimetric method via the qualitative reaction with Nessler’s reagent was used to determine the concentration of ammonium ions. The Co²⁺ and Ni²⁺ content in medium was determined by a colorimetric method with 4-(2-pyridylazo)resorcinol (PAR). Fermentation parameters were calculated with the use of mathematical and statistical ones. Modified Postgate B medium with different sources of carbon and energy (potatoes, alanine, and meat) was used for cultivation of dissimilatory sulfate reducing bacteria. The anaerobic microbiome obtained from the sludge of methane tanks showed high efficiency to remove Co²⁺ and Ni²⁺ from the liquid medium. The highest efficiency (100% in 9 days) was observed when alanine was used as a source of carbon and energy. The slowest metal precipitation process occurred using meat (20 days). Also, the use of a protein substrate did not provide the expected alkalinization of the medium, which could significantly accelerate the process of metal precipitation. The precipitation of cobalt and nickel cations during the hydrogen fermentation of potato starch was complicated by acidification of the medium, but it was equally effective when the pH was adjusted. The proposed approach, the slow dissimilatory sulfate reduction, due to the sparingly soluble calcium sulfate as electron acceptor, can be used as a basis for the development of new biotechnologies for the treatment of wastewater contaminated with divalent heavy metals with the simultaneous treatment of ecologically hazardous compounds.

Keywords: thermodynamic prediction, metal containing wastewater purification, environmental biotechnologies, metals detoxification, metal pollution, toxic metals, sulfate reduction, ammonification, environmentally hazardous compounds.

ЦЕЛУЛОЛИТИЧНИ МИКРООРГАНИЗМИ: АЕРОБНИ, МИКРОАЕРОФИЛНИ, АНАЕРОБНИ БАКТЕРИИ И МИКРОБНИ КОНСОРЦИУМИ (Част II)
Яна Гочева, Людмила Димитрова, Венелин Хубенов, Людмила Кабаиванова, Пламен Ангелов, Иван Симеонов, Христо Найденски
Резюме. В природата целулозата, лигноцелулозата и лигнинът са основни източници на растителна биомаса, поради което тяхното рециклиране е незаменимо за въглеродния цикъл. Синергичното действие на различни микроорганизми е необходимо за рециклиране на лигноцелулозни материали. Капацитетът на микроорганизмите да асимилират сложни въглехидрати, като целулоза, хемицелулоза и лигнин, зависи от способността да произвеждат ензими, които работят синергично. Популациите, растящи в компостни купчини, се състоят главно от бактерии (включително актинобактерии) и гъбички. Полимери като хемицелулоза, целулоза и лигнин се разграждат само след като по-лесно разградимите съединения са били изразходвани. След това лигноцелулозните материали се трансформират частично в хумус. В настоящия обзор многобройни изследвания върху изолирането на разграждащи целулозата бактерии и гъбички, тяхната идентификация, ензимни активности и способността им да растат в присъствието на лигноцелулоза и компоненти на тези промишлени отпадъчни потоци (фенолни съединения, сулфиди и багрила) са анализирани и обсъдени. Това е от особен интерес за планиране на бъдещи проучвания за изолиране на онези бактерии, които могат специфично да разграждат целулозната матрица и по-неподатливи компоненти като лигнин и ароматни продукти на разграждане на лигнин. Култивирането и характеризирането на микроорганизмите сами по себе си не е адекватно без техники за консервиране, които не променят морфологията, физиологията или генетиката на чистите щамове Внимателното съхранение е наложително за бъдещи изследвания, обучение и индустриални приложения.
Ключови думи: целулозни микроорганизми, бактерии, гъби, целулозни отпадъци, биоразграждане, консервиране на култури.

CELLULOLYTIC MICROORGANISMS: AEROBIC, MICROAEROPHILIC, ANAEROBIC BACTERIA AND MICROBIAL CONSORTIA (Part II)

Yana Gocheva¹,Lyudmila Dimitrova¹, Venelin Hubenov¹, Lyudmila Kabaivanova¹,Plamen Algelov², Ivan Simeonov, Hristo Najdenski¹

¹ The Stephan Angeloff Institute of Microbiology at the Bulgarian Academy of Sciences

² Space Research and Technology Institute at the Bulgarian Academy of Sciences

Abstract. In nature, cellulose, lignocellulose and lignin are major sources of plant biomass therefore their recycling is indispensable for the carbon cycle. The synergistic action of a variety of microorganisms is needed for recycling lignocellulosic materials. The capacities of microorganisms to assimilate complex carbohydrates, such as cellulose, hemicellulose and lignin, depend on the ability to produce the enzymes that work synergically. Populations growing in compost piles consist mainly of bacteria (including actinobacteria) and fungi. Polymers such as hemicellulose, cellulose, and lignin are only degraded once the more easily degradable compounds have been consumed. Afterwards, the lignocellulosic materials are partly transformed into humus. In the present review, numerous studies on the isolation of cellulose-degrading bacteria and fungi, their identification, enzymatic activities, and their ability to grow in the presence of lignocellulose and components of these industrial waste streams (phenolic compounds, sulfides, and dyes are analyzed and discussed. This is of particular interest to design future studies to isolate those bacteria that can specifically degrade cellulose matrix and more recalcitrant components such as lignin and aromatic lignin degradation products. Cultivation and characterization of microorganisms alone is not adequate without preservation techniques that do not alter the morphology, physiology or genetics of pure strains. Careful preservation is imperative for future research, teaching and industrial applications.
Keywords: cellulolytic microorganisms, bacteria, fungi, cellulose waste, biodegradation, culture preservation.

МЕТОДОЛОГИЯ ЗА КИНЕМАТИЧЕН МОДЕЛ НА СИСТЕМА ЗА РАННО ПРЕДПРУЖДЕНИЕ ПРИ ЗЕМЕТРЕСЕНИЯ

Бойко Рангелов, Гаро Мардиросян

Резюме: Предложена е методология, за изграждане и алгоритъм на действие на кинематична система за ранно предупреждение от земетресение с насоченост към критична инфраструктура. Системата използва фундаментално свойство на обемните сеизмични вълни Р и S и по-точно разликата в скоростите им на разпространение. Известно е, че първичните вълни се разпространяват по-бързо от вторичните, които са 1.41 пъти по бавни, но са много по-разрушителни от първичните. Основа на концепцията е разполагането на автономен сеизмичен датчик в максимална близост до сеизмичното огнище – източник на земетресението. Системата се състои от множество подобни датчици, свързани в мрежа. По-голям брой датчици – по-голяма надеждност на системата. При трус, датчика регистира първичната сеизмична вълна и сигнализира със съобщение. Критично е предаването на сигнала към другите сеизмични датчици и потребителите. Възможностите на съвременните средства за комуникация – клетъчни телефони, сателитна връзка, радиосигнали и други средства за комуникация позволяват бърз трансфер на информацията. Така, системата сигнализира, че е станало земетресение, сеизмичните вълни се разпространяват радиално от огнището, а системата обезпечава сигнализация за по-късното пристигане на вторичните (по-разрушителни) вълни за потребителите.
Ключови думи: кинематичен модел, ранно предупреждение, земетресение, критична инфраструктура

METHODOLOGY FOR A KINEMATIC MODEL OF SEISMIC EARLY WARNING SYSTEM ABOUT CRITICAL INFRASTRUCTURE

Boyko Ranguelov¹, Garo Mardirosian²¹ Sofia University of Mining and Geology „St. Ivan Rilski”, Sofia, Bulgaria.² Space Research and Technology Institute at the Bulgarian Academy of Sciences, Sofia, Bulgaria.
Abstract: The destructive earthquakes generated huge losses and human victims. As for the moment the time of impending strong seismic event is unpredictable, during the last years – new global innovation is under development – the seismic early warning systems (SEWS). All of them signalize the population and/or governmental bodies and after the earthquake starts just providing information that the seismic event is fact, to expect stronger shakings and some very fast measures to be performed – for example NPP’s reactors stop, as well as superfast trains, chemical production, gas and oil pipeline disconnection, etc. In lucky cases some people can react (especially in the areas of low buildings) and to evacuate effective in the time domain of few seconds, thus saving their lives. Such system is in operation in Japan since 2007 and some other countries also develop their own SEWS. The present investigation is targeted to the methodology development of so called kinematic SEWS. They are using a fundamental property of the body seismic waves P and S. As it is well known from the theory, the P-waves are faster and less destructive than S-waves. This property gives the possibility to use the detection of the P waves as important signal that after a while (the time domain depends on the distance between the seismic source and the investigated site) the slower (1.41 times) more destructive S waves will arrive and struck the infrastructure. Our previous experience of the developed SEWS (for example for Baku and Venice) gives the possibility to upgrade the modeling methodology extending to the formalized algorithm and accuracy estimations, especially for the critical infrastructure (for example NPP).

Keywords: kinematic model, early warning system, critical infrastructure.

CARBON MATERIALS FROM WASTE BIOMASS AS ANTI-BACTERIAL AIR FILTERS

Georgi Georgiev¹, Venelin Hubenov², Ivanka Stoycheva¹, Rumyana Eneva², Bilyana Petrova¹, Urszula Szeluga³, Slawomira Pusz³, Marieta Belcheva², Boyko Tsyntsarski¹

¹Institute of Organic Chemistry with Centre of Phytochemistry, Bulgarian Academy of Sciences, Sofia, Bulgaria

²The Stephan Angeloff Institute of Microbiology, Bulgarian Academy of Sciences, Sofia, Bulgaria

³Centre of Polymer and Carbon Materials, Polish Academy of Sciences, Poland

Abstract. Carbon materials from almond shells were developed for the adsorption of microorganisms from air. Samples were processed by means of a one-step process – high-temperature hydro-pyrolysis. Studies were carried out in a wide temperature range of 600-900 °C. As a result, carbonates with predominant micro- and mesopores were obtained. The samples were impregnated with zinc, silver, iron and copper 5% by weight. The obtained samples were characterized by XDR, BET, scanning electron spectroscopy and elemental analysis. The final products are distinguished by a moderate surface and the presence of nanosized metal particles. The antibacterial properties of the activated carbon composites were examined using standard methodology under dynamic contact conditions and Escherichia coli K12 as test microorganism. All tested composite materials exhibit strong antibacterial properties after 48 h of contact with microbial cells. Thus the application of these materials in filtering system will be possible solution for successful reduction of microbial cell number. It is assumed that a similar effect can be achieved in an air environment.
Keywords: activated carbon composites, antibacterial activity, waste almond shells.

БИОЦИДНО ДЕЙСТВИЕ НА АНОЛИТА
С. Караджов, Т. Попова, И. Игнатов, Л. Димитрова, И. Николова, В. Късовски, Х. Найденски, Г. Глухчев
Резюме. Анолитът, получен при електрохимично активиране на нискоминерализирани водни разтвори, притежава силно биоцидно действие поради своите физико-химични свойства. Това изследване представя кратък обзор за ефекта от прилагането на анолит върху проби от различни видове микроорганизми. Налице е представа за физико-химичните процеси, протичащи в анодната камера на електролизера. Изследвани са промените в параметрите pH, ОРП и наличието на активен хлор през времето и при различни условия на съхранение на анолита. Експериментите показаха тяхната стабилност и запазване на биоцидната активност за период над 9 месеца. Представени са експериментални резултати от изследвания на биоцидния ефект на анолита, проведени в различни лаборатории.
Ключови думи: електрохимично активиране, анолит, pH, ОРП (окислително-редукционен потенциал), биоциден ефект, патогени.

BIOCIDAL ACTION OF ANOLYTE

S. Karadzhov¹, T. Popova², I. Ignatov³, L. Dimitrova⁴, I. Nikolova⁴, V. Kussovski⁴, H. Naidenski⁴, G. Gluhchev⁵

¹ Bulgarian Association of Activated Water, 39 Kutuzov blvd, Sofia 1619, Bulgaria
² Institute of Forestry at BAS, 10 Kl. Ohridsky blvd, 1756, Sofia, Bulgaria
³ Scientific Research Center of Medical Biophysics, 32, N. Kopernik Street, Sofia 1111, Bulgaria
⁴ Institute of Microbiology at BAS, 25 Acad. G. Bonchev, Sofia 1113, Bulgaria
⁵ Institute of Information and Communication Technologies at BAS, 2, Acad. G. Bonchev, Sofia 1113, Bulgaria

Abstract. The anolyte, obtained during electrochemical activation of low mineralized water solutions possesses a strong biocidal action due to its physical-chemical properties. This study presents a brief report for the effect of anolyte application to samples of different kind of microorganisms. An idea of the physical-chemical processes taking place in the anode chamber of an electrolyzer is present. The changes in the parameters pH, ORP and the presence of active chlorine during the time and at different storage conditions of the anolyte were examined. The experiments showed their stability and preservation of biocidal activity for a period longer than 9 months. Experimental results from investigations of the biocidal effect of anolyte carried out in different laboratories are present.
Keywords: electrochemical activation, anolyte, pH, ORP (Oxidation Reduction Potential), biocidal effect, pathogens

ОБЩА АЛФА И ОБЩА БЕТА АКТИВНОСТ НА МИНЕРАЛНИ ВОДИ ОТ ЮГОЗАПАДНА БЪЛГАРИЯ

Елена Гелева, Светослав Димитров, Николай Гутев, Вержиния Варийска, Димитър Тонев

Резюме: Определени са нивата на естествената радиоактивност на минерални води от някои най-често използвани източници в Югозападна България. Изследването е насочено към определяне на съдържанието на обща алфа и обща бета активност, за да се провери дали активностите са под границите, при които не се изискват допълнителни действия. Измерванията бяха направени с течносцинтилационен спектрометър. Резултатите за обща алфа и обща бета активност варират от ≤ 0.003 Bq/L до 0.671 Bq/L и от 0.054 и 0.375 Bq/L, съответно. Стойностите, получени в това проучване, бяха сравнени с данни, докладвани от други автори в различни страни и с референтните стойности, приети за питейна вода.На базата на получените резултати е направена оценка на очакваните годишни ефективни дози за възрастни индивиди, при допускането, че средно годишната консумация на минерална вода е 730 литра. За всички изследвани води, с изключение на една, стойностите на годишната ефективна доза са по-ниски от максимално установената 100 µSv/y, съгласно препоръките на Световната здравна организация (СЗО).
Ключови думи: обща алфа активност, обща бета активност, минерална вода, годишна ефективна доза.

GROSS ALPHA AND BETA ACTIVITY IN MINERAL WATER FROM SOUTHWEST BULGARIA

Elena Geleva, Svetoslav Dimitrov, Nikolay Goutev, Verzhinia Variyska, Dimitar Tonev

Institute for Nuclear Research and Nuclear Energy, Bulgarian Academy of Sciences,Sofia, Bulgaria

Abstract. The natural radioactivity levels of mineral water from certain most frequently used sources in Southwest Bulgaria were determined. The mineral water was investigated with regard to gross alpha and beta activity to determine whether the activity concentrations are below levels at which no further action is required. The measurements were made by Liquid Scintillation Spectrometer. The gross alpha and beta activity varied from ≤ 0.003 Bq/L to 0.671 Bq/L and from 0.054 and to 0.375 Bq/L, respectively. The values obtained in this study were compared with data reported by other authors in different countries and with reference values accepted for drinking water.
The annual effective doses were calculated for all investigated waters for adult inhabitants assuming yearly consumption of 730 litres. The results show that the annual effective dose of ingestion of these water samples excluding one, are below the individual dose criterion of 100 µSv/y according to the World Health Organization recommendations.
Keywords: gross alpha activity, gross beta activity, mineral water, annual effective dose.